艾灸延缓衰老的作用及对细胞周期的影响

医者仁心

    艾灸对老年人衰老症状及外周血单个核细胞细胞周期的影响

     摘 要: 目的: 探讨艾灸延缓衰老的作用及对细胞周期的影响。方法: 将 61名 60~ 75岁老年人随机分为艾灸治疗组和衰老对照组, 并另设正常青年人对照组。艾灸组以温和灸肾俞和关元穴, 疗程 3个月。采用积分表法观察艾灸对老年人衰老症状的变化情况, 用流式细胞术检测老年人外周血单核细胞细胞周期变化。结果: 艾灸组较衰老对照组衰老症状积分明显降低 ( P < 0. 01),综合疗效、主症有效率均明显升高 ( P < 0. 01); G0 /G1期细胞比例明显减少 ( P < 0. 01),P I指数显著升高 ( P < 0. 01)。结论: 提示艾灸不仅可明显改善老年人衰老症状, 且可能通过降低细胞周期 G0 /G 1期细胞比例, 升高 PI指数, 增加有丝分裂原的反应能力和合成 DNA的能力, 使细胞进入 S期, 从而发挥延缓细胞衰老的作用。

    关键词: 艾灸; 衰老; 细胞周期; 临床研究

       随着全球老龄化社会的发展, 延缓衰老和使老年人达到健康衰老是目前医学界关注的焦点。本课题组自上个世纪80年代即开展艾灸防治衰老的临床和基础研究, 证实艾灸对延缓衰老具有较好的疗效, 艾灸可以改善老年机体的各项功能, 在清除自由基损伤、调节神经内分泌免疫功能、调整脂质代谢、改善血液流变性以及调节微量元素等方面均有较满意的效果。本研究在以往的研究基础上, 采用艾灸肾俞、关元穴观察对老年人衰老症状及外周血单核细胞细胞周期的影响, 以期进一步探讨艾灸延缓衰老的作用机制。现将结果报道如下。

       1 临床资料

       1. 1 一般资料   所有观察对象均为年龄 60 ~ 75 岁志愿老年人( 无心、脑、肺、肝、肾、内分泌等疾病者 ) 共 61 例。随机分成艾灸治疗组 31例和衰老对照组 30例, 艾灸治疗组中男 10例, 女 21例; 年龄最小 60岁, 最大 75岁,平均 ( 68. 48±5. 32) 岁; 衰老症状平均积分 ( 40.13 ±3. 62)分, 最高 46分, 最低 33分。衰老对照组中男 12例, 女 18例; 年龄最小 60岁, 最大 75岁, 平均 ( 67. 70±4. 91) 岁; 衰老症状平均积分 ( 38. 80 ±3. 46) 分, 最高 45分, 最低 34分。经统计学分析, 两组老年人的性别、年龄、和治疗前衰老症状积分情况无明显差异 ( P> 0. 05) , 具有可比性。

      1. 2 诊断标准   参照国家卫生部颁布的 《抗衰老药物临床研究指导原则》实行标准, 并根据世界卫生组织(WHO)最近提出的老年人划分标准, 选择 60~ 75岁的老年人。

       1. 3 中医辨证分型   根据中医辨证均为肾阳虚型。临床证见: 腰膝酸软, 畏寒肢冷, 夜尿频, 精神不振, 气短而喘, 大便溏薄, 发脱或变白, 健忘, 齿摇, 性欲减退,面目虚浮, 舌淡胖而润、苔白厚, 脉沉迟、两尺脉弱。

      2 治疗方法

      将 61名老年人根据随机数字表随机分为艾灸治疗组和衰老对照组两组, 同时, 另设正常青年人作为正常对照组。

( 1) 艾灸治疗组 (n= 31): 温和灸肾俞穴、关元穴, 每次治疗取单侧肾俞穴, 两侧交替, 每穴每次灸20m in, 每周治疗 3次, 连续治疗 18次为 1个疗程。 1个疗程结束后观察临床症状变化, 然后继续第 2个疗程治疗, 并在第 2个疗程结束后观察临床症状及实验指标的变化。

( 2) 衰老对照组 ( n = 30) : 空白对照, 不做治疗。

( 3) 正常青年对照组 ( n = 30): 正常对照, 不做治疗, 年龄 25~ 35岁。

疗效观察: ( 1)临床症状指标: 治疗后疗效情况; 治疗后衰老症状积分变化情况; 治疗后主要衰老症状变化情况; 治疗组衰老症状变化情况与疗程的关系。 ( 2)实验指标: 于 2个疗程结束后抽取空腹静脉血,采用流式细胞术检测外周血单核细胞细胞周期。具体操作将取肝素抗凝外周血 100μLL 置于流式检测管中, 加入 DNA- P rep LPR 100μLL, 混匀, 室温避光孵育 20m in, 加 DNA- P rep Stain 500μLL, 混匀, 室温避光孵育 15m in, 上流式细胞仪( Beckman Coulter EPICS XL)检测。

统计学处理: 运用 SPSS11. 0统计软件进行处理。计量资料采用 t检验, 计数资料采用 X2检验; 细胞周期各期所占的百分数以均数±标准差表示, 采用单因素方差分析, 不符合方差分析条件的, 采用秩和检验。

      3 疗效评定标准与结果

      3. 1 疗效评定标准   ( 1) 衰老症状观察: 根据第三次全国中医、中西医结合老年医学研究协作组会议制定的《延缓衰老中药的筛选规程和临床观察规范》附件中的衰老辨证标准中肾阳虚证。

( 2) 临床症状评分标准: 参照第三次全国中医、中西医结合老年医学研究协作组会议制订的《延缓衰老中药的筛选规程和临床观察规范》附件中衰老症状积分值的评定方法, 并根据 《现代老年药学》抗衰老药物临床评价中衰老症状积分标准, 每项症状记分之总和为衰老见证积分值。

( 3) 疗效评定标准: 参照第三次全国中医、中西医结合老年医学研究协作组会议制订的《延缓衰老中药的筛选规程和临床观察规范》附件中的疗效判断标准实行; 显效: 治疗后衰老见证积分下降之值≥2 /3治疗前平均衰老见证积分值; 有效: 治疗后衰老见证积分下降之值在 1 /3~ 2 /3治疗前平均衰老见证积分值之间; 无效: 治疗后衰老见证积分下降之值≤1 /3治疗前平均衰老见证积分值。

      3. 2 结果  

( 1) 综合疗效情况: 结果可见, 艾灸治疗组总有效率为 87. 10% ; 衰老对 照组总有 效率10. 00% 。经统计学处理, 与衰老对照组相比, 艾灸治疗组有效率有显著性差异 ( P < 0. 01)。

( 2)衰老症状积分变化情况: 由结果可见, 衰老症状积分自身前后对照显示: 艾灸组治疗后积分较治疗前有显著性降低 ( P < 0. 01), 而衰老对照组治疗前后积分变化不明显 ( P > 0. 05); 两组间衰老症状积分比较, 艾灸组明显优于衰老对照组, 差异具有显著性意义( P < 0. 01) 。

( 3)主要衰老症状变化情况: 由结果可见, 腰膝酸软改善情况, 艾灸组 31例中, 显效 26例, 有效 1例, 无效 4例, 总有效率 87. 10% ;衰老对照组 30例, 显效 0例, 有效 3例, 无效 27例, 总有效率 10. 00% 。畏寒肢冷改善情况, 艾灸组 31例, 显效 27例, 有效 1例, 无效3例, 总有效率 90. 32% , 衰老对照组 30例, 显效 2例,有效 6例, 无效 22例, 总有效率 26. 67% 。经统计学处理, 艾灸治疗组在主症腰膝酸软、畏寒肢冷方面改善显著优于衰老对照组, 有效率有显著性差异 ( P < 0. 01)。

      艾灸对老年人外周血单个核细胞细胞周期的影响: 从结果显示, 衰老对照组老年人外周血单个核细胞G0 /G1期细胞比例增多, P I指数降低, 与正常青年组相比均有显著性差异 ( P < 0. 01); 而艾灸治疗组老年人外周血单个核细胞细胞 G0 /G1期细胞比例减少, PI指数升高, 与衰老对照组相比, 均有显著性差异 ( P 均< 0. 01), 但与正常青年组比较仍有明显差异 ( P 均< 0. 01) 。

P I= ( S+ G2/ M ) /( G0/G1+ S+ G2/M )×100%

医者仁心

4 讨 论
     艾灸是中医传统的治疗方法之一, 能调节机体功能, 具有调和阴阳、疏通经络、行气活血、扶正祛邪的作用, 历来被认为是养生保健、抗衰老的重要方法。对于灸法抗老延寿的认识, 早在春秋战国时期就已开始。现代研究亦证明, 艾灸特定的穴位具有强壮脏腑, 调节及增强免疫功能的作用。近年来, 有关艾灸延缓衰老机理的研究很多, 但多为整体、组织、器官水平的, 证实其对老年人的内分泌系统、免疫系统、自由基代谢等都有良好的调节作用。
      中医学认为, 肾气的盛衰在生命过程起主导作用,且肾气的强弱很大程度上决定衰老与否、衰老速度的快慢及寿命的长短。因此, 本研究根据肾虚 (肾阳虚 )与衰老的密切相关性, 选取肾俞及关元穴艾灸治疗。肾俞穴属足太阳膀胱经, 为肾之背俞穴, 是肾气转输、输注之处, 由于肾虚是衰老主因, 故取肾俞穴以补肾益精、强壮保健, 是延缓衰老的主要用穴。关元穴, 为任脉要穴, 又是足三阴经及任脉之会穴、小肠之募穴, 具有温肾固精、补气回阳、调理冲任之功, 为强壮延衰要穴。本研究采用艾灸上述两穴后发现, 艾灸组治疗后较治疗前在衰老症状积分、主要衰老症状方面均有明显改善, 且较衰老对照组在有效率以及衰老症状积分、主要衰老症状改善方面均有显著性差异。
      近年来研究发现, 衰老的基本变化是细胞内的变化, 而细胞内的变化又以细胞周期变化为基础。细胞周期是细胞生命活动的基本过程, 细胞老化与细胞周期停滞有关。细胞周期分为 G1、S、G2和 M 期 4个期, 细胞经历周期时相变迁为进入增殖、分化、衰老和死亡等生理过程。在高等生物中, 细胞周期有两个关卡, G1 /S和 G2 /M 关卡, 而 G1 /S关卡对细胞周期的调控更为重要。细胞衰老最显著的特征是细胞在很长一段时间内仍维持代谢活性, 但因阻滞于 G1期, 失去了对有丝分裂原的反应能力和合成 DNA的能力, 不能进入 S期。
本临床研究结果显示, 与正常组青年人比较, 衰老对照组老年人外周血单个核细胞 G0 /G1期细胞比例明显升高, PI指数明显下降; 而艾灸治疗组老年人外周血单个核细胞细胞 G0 /G1期细胞比例明显降低, PI指数明显升高。提示, 艾灸可能是通过降低老年人外周血单个核细胞 G0 /G1期细胞比例, 升高 PI指数, 增加有丝分裂原的反应能力和合成 DNA的能力, 使细胞进入 S期, 从而发挥其延缓衰老的作用, 但其具体的调节机制尚待进一步深入研究。